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戴安液相色譜柱的這些小細節,你注意到了嗎?
  • 發布日期:2022-01-13      瀏覽次數:209
    •   戴安液相色譜柱的維護
        1、建議使用保護柱,防止顆粒進入柱內造成堵塞;
        2、建議選擇合適pH范圍的色譜柱,避免填料溶劑老化;
        3、緩沖鹽的正確使用:
        緩沖鹽使用不當會沉淀,堵塞篩板和填料,使填料變硬,增加柱壓,阻礙基質上鍵合相的碳鏈自由伸展,降低色譜柱的保留能力,降低柱效率并縮短其使用壽命。緩沖鹽分離后很難去除。因此,正確使用緩沖鹽對于延長色譜柱的使用壽命非常重要。
        戴安液相色譜柱使用前過渡,使用后沖洗
        1、等度條件:用過渡流動相制備前后柱體積不少于20-30柱,或制備后用過渡流動相以1.0ml/min(根據色譜柱規格調整)洗柱體積過夜;
        2、梯度條件:制備前,用與初始流動相相同的流動相組成,以工作流速洗滌色譜柱不少于20-30柱體積;配制后用過渡流動相洗色譜柱不少于20-30柱體積,梯度盡量平緩,避免緩沖鹽沉淀;
        3、過渡型流動相:有機相和水相的比例與分析流動相中兩相的比例一致,或者水相的比例高于分析流動相,完全沒有緩沖鹽;
        強保留物質在戴安液相色譜柱中的積累是一個緩慢的過程,導致峰展寬和拖尾,柱效下降,保留時間改變,柱壓升高;很難判斷復雜樣品中是否存在強滯留物質,因此必須杜絕所有這些方法。每天分析完畢后,用純甲醇或乙腈反洗色譜柱20柱體積以上。
        戴安液相色譜柱清洗方法:
        1、沒有使用緩沖鹽。每天使用后,用純甲醇或純乙腈的柱體積在20以上;
        2、上述方法除去緩沖鹽后,用純甲醇或純乙腈反洗柱子20柱體積以上;
        3、處理方法:水→乙腈→異丙醇(或氯仿)→乙腈→水,每步洗滌不少于30柱體積。
        注意:不要輕易打開柱頭,因為柱頭一旦打開,就很難恢復到新柱的水平。因柱頭開啟造成的檢測后果由客戶負責。
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